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Bestimmung von 6-Methylkumarin in Kosmetika durch Flüssigchromatographie

2024-10-22

Bestimmung von 6-Methylkumarin in Kosmetika durch Flüssigchromatographie

1.1 Ausstattung der Geräte

Tabelle 1 Konfigurationsliste der Flüssigchromatographie

- Nein. Ich weiß nicht.	Modul	Qty
1	PB3210 Binärpumpe	1
2	CT3400 Kolonnenofen	1
3	AS3210 Autosampler	1
4	UV3210 UV-Detektor	1
5	NovaChrom SC18 4,6*250 mm, 5 μm	1
6	SmartLab-Arbeitsplatz	1

1.2 Versuchsmethode

1.2.1 Reagenzien

Tabelle 2 Liste der Reagenzien

- Nein. Ich weiß nicht.	Reagenzien	Reinheit
1	Methanol	Chromatographische Qualität
2	6-Methylkumarin	99 Prozent
3	Ammoniumdihydrogenphosphat	AR
4	Phosphorsäure	GR

1.2.1.1 6-Methylkumarin-Standard-Stammlösung (1000 mg/l): Eine angemessene Menge 6-Methylkumarin-Standard wird eingenommen.aufgelöst und das Volumen mit Methanol fixiert und zu einer Konzentration von 1000 mg/l Standardstocklösung hergestellt.

1.2.1.2 6-Methylkumarin-Standardlösung:Pipettieren Sie eine angemessene Menge 6-Methylkumarin-Standard-Stammlösung und verdünnen Sie sie mit Methanol, um eine Reihe von Arbeitskurven mit Konzentrationen von 0 herzustellen..1mg/L, 0,5mg/L, 1,0mg/L, 3,0mg/L, 5,0mg/L bzw. 10,0mg/L.

1.2.1.3 Natriumdihydrogenphosphat-Pufferlösung: Nehmen Sie 3,12 g Natriumdihydrogenphosphat, fügen Sie Wasser hinzu, um es aufzulösen und auf 1000 ml zu verdünnen, und stellen Sie den pH-Wert der Phosphorsäure auf 3.5.

1.2.2 Chromatographische Bedingungen

Tabelle 3 Chromatographische Bedingungen

Chromatographische Spalte	NovaChrom SC18 4,6*250 mm 5 μm
mobile Phase	A: Methanol,B:Natriumdihydrogenphosphat Pufferlösung
Fließrate	1 ml/min
Kolonnentemperatur	35°C	Wellenlänge	275 nm
Injektionsvolumen	10 μl

Tabelle 4 Gradient-Elutionsprogramm

Zeit (min)	mobile Phase A	mobile Phase B
0	55	45
11	55	45
12	90	10
40	90	10
41	55	45
50	55	45

1.2.3 Vorbehandlung der Proben

Nehmen Sie 1 g (genau bis 0,001 g) der Probe in einen 10 ml großen Kolben, fügen Sie 5 ml Methanol hinzu, wirbeln und schütteln, um die Probe vollständig mit der Extraktionslösung zu mischen, Ultraschall-Extraktion für 20 Minuten,auf Raumtemperatur abgekühlt und anschließend mit Methanol auf 10 ml festgesetzt, gemischt und anschließend in Zentrifugenröhren übertragen, 5 Minuten lang bei 5000 r/min zentrifugiert,und der Übernatant durch die 0 gefiltert.45 μm organische Membran und dann zu prüfen.

2Das Ergebnis des Experiments.

2.1 Systemtauglichkeit

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Abbildung 1 10 mg/l Chromatogramm der Normen

Tabelle 5 Prüfdaten für Normen von 10 mg/l

Zusammensetzungen	Aufbewahrungszeit	Spitzenfläche	Theoretische Nummer der Platte
6-Methylkumarin	11.168	574.285	15854

Anmerkung:Das Chromatogramm und die Daten zeigen, dass 6-Methylkumarin eine gute Spitzenform aufweist, dass es keine anderen Spitzen um den Zielspitzen herum gibt und dass die theoretische Plattenzahl hoch ist.die den Versuchsanforderungen entspricht.

2.2 Standardkurve

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Abbildung 2 Prüfergebnis der Standardkurve

Anmerkung: Das Chromatogramm zeigt, dass der R-Wert des Korrelationskoeffizienten der 6-Methylkumarin-Kurve über 0 liegt.9999, die den Versuchsanforderungen entspricht.

2.3 Wiederholbarkeit

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Abbildung 3 Wiederholbarkeitschromatogramm von 3 mg/l Standards für 6 Injektionen

Daten zur Wiederholbarkeit von 3 mg/l Standards für 6 InjektionenTabelle 6 Daten zur Wiederholbarkeit von 3 mg/l Standards für 6 Injektionens

6-Methylkumarin	- Nein. Ich weiß nicht.	Aufbewahrungszeit	Spitzenfläche
	1	11.159	177.710
	2	11.161	176.711
	3	11.142	177.128
	4	11.152	176.985
	5	11.150	177.469
	6	11.149	177.629
	RSD (%)	0.061	0.222

Anmerkung: Gemäß den Daten der obigen Tabelle beträgt die RSD der Retentionszeit-Wiederholbarkeit von 6-Methylkumarin 0,061%, die RSD der Peak-Area-Wiederholbarkeit 0,222%.Die Wiederholbarkeit ist gut und erfüllt die Versuchsanforderungen.

2.4 Nachweisgrenze

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Abbildung 4 Testchromatogramm von 0,02 mg/l Standards

Tabelle 7 Versuchsdaten für 0,02 mg/l-Standards

Zusammensetzungen	Aufbewahrungszeit	Spitzenfläche	SNR
6-Methylkumarin	11.153	1.208	19.296

Anmerkung: Nach den vorstehenden Daten wird das 3-fache Signal-Rausch-Verhältnis als Detektionsgrenze berechnet, und es wurde festgestellt, dass die Detektionsgrenze von 6-Methylkumarin 0,004 mg/L beträgt.Er erfüllt die Versuchsanforderungen..

2.5 Testergebnis einer kosmetischen Probe

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Abbildung 5 Testchromatogramm einer kosmetischen Probe

Anmerkung: In einer Kosmetikprobe wurde kein 6-Methylkumarin nachgewiesen.

2.6 Achtung

Bei der Verwendung einer Hochgeschwindigkeitszentrifuge ist darauf zu achten, dass die Rohre symmetrisch angeordnet sind und die Gesamtmasse der Rohre auf den gegenüberliegenden Seiten gleich ist.

3Schlussfolgerung.

Die in diesem Artikel eingeführte Analysemethode unter Bezugnahme auf die "Sicherheits- und Technischen Normen für Kosmetika" zur Bestimmung von 6-Methylkumarinmit Wayeal-Flüssigchromatographie der Hochleistungsreihe LC3200 mit UV-DetektorDas Versuchsergebnis zeigt, daß die Spitzenform von 6-Methylkumarin im Anpassungsfähigkeitstest gut ist und es keine anderen Spitzen um den Zielspitzen herum gibt.und die theoretische Plattenzahl ist hochDer Korrelationskoeffizient der Kurve R liegt über 0.9999Die RSD der Retentionszeit-Wiederholbarkeit von 6-Methylkumarin beträgt 0,061%, und die RSD der Peak-Area-Wiederholbarkeit beträgt 0,222%, was eine gute Wiederholbarkeit zeigt..004 mg/l. Alle oben genannten Testergebnisse erfüllen die Anforderungen des Geräts nach der Standardmethode.

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